| รายละเอียดวิทยานิพนธ์ | |
| ชื่อวิทยานิพนธ์ | การพัฒนาชุดตรวจ one step multiplex RT-PCR เพื่อวินิจฉัย avian influenza A virus สายพันธุ์ H5, H7 และ H9 THE DEVELOPMENT OF ONE STEP MULTIPLEX RT-PCR ASSAY FOR H5, H7 AND H9 AVIAN INFLUENZA A VIRUS DETECTION. |
| ชื่อนิสิต | อัญญรัตน์ ต้นธีรวงศ์ Aunyaratana Thontiravong |
| ชื่ออาจารย์ที่ปรึกษา | รศ.น.สพ.ดร. คณิศักดิ์ อรวีระกุลศ.นพ. ยง ภู่วรวรรณ Kanisak Oraveerakul, Ph.D. Yong Poovorawan |
| ชื่อสถาบัน | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. บัณฑิตวิทยาลัย Chulalongkorn University. Bangkok (Thailand). Graduate School. |
| ระดับปริญญาและรายละเอียดสาขาวิชา | วิทยานิพนธ์มหาบัณฑิต. วิทยาศาสตร์ (จุลชีววิทยาทางการแพทย์) Master. Science (Medical Microbiology) |
| ปีที่จบการศึกษา | 2548 |
| บทคัดย่อ(ไทย) | เชื้อ avian influenza A virus สายพันธุ์ H5 และ H7 มักทำให้เกิดโรครุนแรงในสัตว์ปีกหลายชนิด นอกจากนี้เชื้อ avian influenza A virus สายพันธุ์ H5 H7 และ H9มีรายงานว่าสามารถติดต่อสู่คนได้อีกด้วย ในงานวิจัยครั้งนี้ได้มีการพัฒนาวิธี one stepmultiplex RT-PCR เพื่อประกอบการตรวจวินิจฉัย avian influenza A virus สายพันธุ์ H5H7 และ H9 ในตัวอย่างที่แยกได้จากสัตว์ปีกที่มีประวัติอาการสงสัยการติดเชื้อในระบบทางเดินหายใจ ชุด primers ที่ได้ทำการออกแบบนั้นให้ผลผลิตขนาดต่างกันดังนี้คือ 157 คู่เบส(H5), 326 คู่เบส (H7) และ 231 คู่เบส (H9) วิธี one step multiplex RT-PCR นี้มีความไวและความจำเพาะสูงเนื่องจากให้ผลลบต่อเชื้อไวรัสที่ทำให้เกิดโรคในระบบทางเดินหายใจที่สำคัญในไก่และในมนุษย์รวมถึงเชื้อ avian influenza A virus สายพันธุ์อื่นๆ ด้วยและความไวของวิธี one step multiplex RT-PCR เมื่อทำการทดสอบแยกปฏิกิริยากันสำหรับH5 H7 และ H9 RNA transcripts คือ 10('3) copies/(+,m)L นอกจากนี้ความไวของวิธีone step multiplex RT-PCR เมื่อทำการทดสอบ H5 H7 และ H9 RNA transcripts ในปฏิกริยาเดียวกันคือ 10('4) copiess/(+,m)L ดังนั้นวิธี one-step multiplex RT-PCR นี้จึงเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพสูงสามารถใช้ในการตรวจวินิจฉัยเชื้อ avian influenza A virusสายพันธุ์ที่สามารถติดต่อสู่คนได้แก่ สายพันธุ์ H5 H7 และ H9 ในตัวอย่างจากสัตว์ปีกได้อย่างรวดเร็วและแม่นยำ ทำให้มีความเหมาะสมที่สำหรับใช้ในการตรวจเพื่อเฝ้าระวังและเป็นสัญญาณเตือนก่อนที่จะมีการแพร่ระบาดไปยังคน |
| บทคัดย่อ(English) | Avian influenza A virus subtype H5 and H7 have caused severe diseases in domestic poultry.Moreover, H5, H7 and H9 avian influenza A viruses have been proven capable of infecting humans.In the present study, we report the development of a one-step multiplex RT-PCR assay fordetecting H5, H7 and H9 avian influenza A viruses. Three-subtype specific primer sets capableof producing PCR products of 157, 326 and 231 base pairs corresponding to avian influenza Avirus H5, H7 and H9 subtypes, respectively, were utilized together in a one-step, one-tube,reaction. The one-step multiplex RT-PCR assay developed in this study was found to be sensitiveand specific. These primer sets did not amplify genomic DNA or RNA from other human and avianrespiratory viruses or other subtypes of avian influenza A virus in one-step multiplex RTPCRassays performed as a control. The sensitivity of this assay was 10('3) RNA copies/(+,m)L eachfor H5, H7 and H9 subtypes. In addition, the one-step multiplex RT-PCR assay allowed forsimultaneous detection of 10('4) copies/(+,m)L of ~iin vitro~i transcribed RNA of the H5,H7 and H9 subtypes. Taken together, these findings clearly indicated that this novel one-stepmultiplex RT-PCR is a simple assay with high potential for rapid, sensitive, specific and costeffective laboratory diagnosis of H5, H7 and H9 avian influenza A virus isolates from clinicalspecimens of poultry. |
| ภาษาที่ใช้เขียนวิทยานิพนธ์ | |
| จำนวนหน้าของวิทยานิพนธ์ | 74 P. |
| ISBN | 974-17-3704-1 |
| สถานที่จัดเก็บวิทยานิพนธ์ | |
| คำสำคัญ | H5, H7 AND H9 AVIAN INFLUENZA VIRUSES, ONE STEP MULTIPLEX RT-PCR ASSAY |
| วิทยานิพนธ์ที่เกี่ยวข้อง |
|
