| รายละเอียดวิทยานิพนธ์ | |
| ชื่อวิทยานิพนธ์ | การศึกษาการสร้างเอนไซม์จากจุลินทรีย์อุณหภูมิสูงแยกได้ จากปุ๋ยหมักขยะชุมชน Studies on some Properties of Thermophilic Bacteria Isolated from Municipal Solid Waste Composting |
| ชื่อนิสิต | อรลัดา บุญแสน Onladda Boonsaen |
| ชื่ออาจารย์ที่ปรึกษา | ผศ ดร สิรินทรเทพ เต้าประยูร ผศ ดร ดุษฎี อุตภาพ ผศ ดร วิโรจน์ บุญอำนวยวิทยา Asst Prof Dr Sirintornthep towprayoon Asst Prof Dr Dudsadee Uttapap Asst Prof Dr Virote Boonumnuaywittaya |
| ชื่อสถาบัน | สถาบันเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. บัณฑิตวิทยาลัย King Mongkuts Institute of Technology Thonburi. Bangkok (Thailand). Graduate School. |
| ระดับปริญญาและรายละเอียดสาขาวิชา | วิทยานิพนธ์มหาบัณฑิต. วิทยาศาสตร์ (เทคโนโลยีชีวภาพ) Master. Science (Biotechnology) |
| ปีที่จบการศึกษา | 2537 |
| บทคัดย่อ(ไทย) | ปัจจุบันปัญหาสิ่งแวดล้อมกลายเป็นปัญหาสำคัญที่ต้อง เร่งรีบแก้ไข โดยเฉพาะปัญหาด้านขยะ วิธีลดปริมาณขยะให้ น้อยลงที่น่าสนใจคือ วิธีการหมักทำปู๋ย ซึ่งจุลินทรีย์ใน กองปุ๋ยหมัก ส่วนใหญ่เป็นจุลินทรีย์อุณหภูมิสูง จึงได้ ศึกษาเอนไซม์จากจุลินทรีย์อุณหหภูมิสูงในกองปุ๋ยหมัก จากการศึกษาการสร้างเอนไซม์ของจุลินทรีย์อุณหภูมิสูง โดยคัดเลือกเชื้อจุลินทรีย์จากกองปุ๋ยหมักขยะชุมชน จาก โรงกำจัดขยะอ่อนนุช โดยการสุ่มเก็บตัวอย่างปุ๋ยหมักจาก บริเวณที่มีอุณหภูมิสูงประมาณ 55-60 องศาเซลเซียส แล้วนำ ตัวอย่างที่เก็บได้มาคลุกเคล้าให้เข้ากัน นำมา spread plate บนอาหาร selective media 3 ชนิด ซึ่งมีแหล่ง คาร์บอนที่แตกต่างกันคือ เคซีน แป้งมันฝรั่ง และ แอลฟา- เซลลูโลส บ่มเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 60 องศาเซลเซียส นาน 5 วัน เก็บไว้ในถุงพลาสติกที่รัดปากถุงไว้กันการระเหยออก ของน้ำได้เชื้อจุลินทรีย์ 3 ชนิด ที่มีคุณสมบัติต่าง ๆ กัน คือเชื้อ P7, A13 และ C9 จากกลุ่มเชื้อที่สามารถสร้าง เอนไซม์โปรติเอส กลูโคอะไมเลส และเซลลูเลส ได้สูงที่สุด ตามลำดับ นำเชื้อจุลินทรีย์ที่คัดเลือกได้มาศึกษา temperature profile ของการเจริญ พบว่าเชื้อจุลินทรีย์ทั้ง 3 ชนิด สามารถเจริญได้ดีที่อุณหภูมิ 55 องศาเซลเซียส และเมื่อนำ มาตรวจกิจกรรมการสร้างเอนไซม์ของเชื้อพบว่าที่อุณหภูมิ 65 องศาเซลเซียส สามารถให้การเกิดกิจกรรมของเอนไซม์ได้ดี ที่สุด ในการศึกษาผลของน้ำสกัดขยะต่อการสร้างเอนไซม์ทั้ง 3 ชนิด โดยใช้ความเข้มข้นของน้ำสกัดขยะ 0, 5, 10 และ 50 เปอร์เซ็นต์ พบว่าน้ำสกัดขยะ 5 เปอร์เซ็นต์ สามารถให้ กิจกรรมการสร้างเอนไซม์ได้ดีที่สุด เมื่อทดลองเปรียบเทียบ การเติมและไม่เติมยีสต์สกัด 0.1 เปอร์เซ็นต์ ลงในอาหาร เลี้ยงเชื้อที่มีน้ำสกัดขยะ 5 เปอร์เซ็นต์ พบว่าการเติม หรือไม่เติมยีสต์สกัดลงไป จะให้ผลไม่แตกต่างกัน จึงเลือก การเลี้ยงเชื้อในอาหารที่มีน้ำสกัดขยะ 5 เปอร์เซ็นต์ ไม่ใช่ยีสต์สกัด และพบว่าการสร้างเอนไซม์โปรติเอส สามารถ ใช้น้ำตาลเดกซ์โตรส 0.25 เปอร์เซ็นต์ เติมลงในอาหารเลี้ยง เชื้อแทนการใช้เคซีนได้ พบว่าเชื้อ C9 สามารถสร้างเอนไซม์ทั้ง 3 ชนิดได้ ค่อนข้างดี เมื่อเลี้ยงเชื้อ C9 ร่วมกับเชื้อ P7 สามารถ สร้างเอนไซม์กลูโคอะไมเลส และให้ค่ากิจกรรมเป็น 2.638 units/ml ซึ่งสูงกว่าการเลี้ยงเชื่อเดี่ยว ๆ ส่วนการเลี้ยง เชื้อผสมระหว่างเชื้อ C9 กับเชื้อ P7 และเชื้อ C9 กับเชื้อ A13 ไม่ปรากฎการเพิ่มกิจกรรมของเอนไซม์เซลลูเลส เมื่อเปรียบเทียบกับการเลี้ยงเชื้อเดี่ยว โดยเฉพาะถ้าวัด เป็น FPAse กิจกรรมจะลดลง ดังนั้นในการเลือกเลี้ยงเชื้อ เพื่อการผลิตเอนไซม์อุณหหภูมิสูงจากเชื้อที่แยกได้จากขยะ ทั้ง 3 เชื้อนี้ ควรพิจารณาการสร้างเอนไซม์หลัก เพื่อเลือกเลี้ยงเชื้อในสภาพเดี่ยว ๆ หรือเลี้ยงผสมกัน เพื่อให้ได้ปริมาณเอนไซม์ที่ต้องการสูงสุด |
| บทคัดย่อ(English) | The study of thermophilic eznymes of microorganism from municipal solid waste compost was done by isolating and screening microbes from municipal solid waste compost at On-nuch composting plant by using the randomized sample collection from the windrow compost at 55-60 degree C. The compost samples were screen for protease, cellulase and glucoamylase producting enzymes by using the basal medium contained 1% of casein, 0.1% of ...- cellulose and 0.1% of potato starch as the carbon source of these enzyme, respectively. the screening bacteria were P7, A13 and C9 for the high production of protease, cellulase, and glucoamylase, respectively. The temperature profile of these 3 strains showed the optimum at 55 degree C with optimum enzyme activity at 65 degree C. The effect of the concentration of garbage extracted medium on the production of enzymes were studies at 0, 5, 10, and 50% of garbage extracted. Maximum enzyme activity was observed in 5% garbage extracted media. There was no significant differrent in the 5% garbage medium with and with and without yeast extract. With the supplement of 0.25% dextrose in the 5% garbage medium, the protease production was high. Strain C9 expressed the most preferable result in producing those 3 enzymes. The mixed culture of C9 and P7 can produce higher glucoamylase than the culture of single strain. There was no significant increment in CMCase production in the mixed culture of C9 and A13 compared to the single strain culture. On the contrary, the production of FPAse was drop when using the mixture of C9 and A13 as inoculum. Thus, attempt to produce thermophilic enzymes should be considered upon the strain used in pure of mixed culture in order to archieve the highest disirable enzyme activity. |
| ภาษาที่ใช้เขียนวิทยานิพนธ์ | |
| จำนวนหน้าของวิทยานิพนธ์ | |
| ISBN | |
| สถานที่จัดเก็บวิทยานิพนธ์ | |
| คำสำคัญ | Thermophilic, Protease enzyme, Glucoamylase enzyme, Cellulase enzyme, Dextrose, Garbage medium, จุลินทรีย์อุณหภูมิสูง, น้ำสกัดขยะ, เอนไซม์โปรติเอส, เอนไซม์กลูโคอะไมเลส, เอนไซม์เซลลูเลส, FPAse |
| วิทยานิพนธ์ที่เกี่ยวข้อง |
|
